Q1：人眼最敏感的是绿色吗？
A1：是的。
Q2：同轴光显微镜的原理是什么？
A2：显微镜都是同光轴的。同轴光是指光源通过半透半反射分光片，该分光片将光反射到物体上，再由物体反射到镜头中，由于物体反射后的光与相机处于同一个轴线上，因此，此种方式的照明被称为同轴光。
Q3：等效焦距与工作距离到底是什么区别？
A3：工作距离是指当看清标本的时候，标本焦平面到镜头的距离。等效焦距是Tube Length除以物镜倍数得到的距离。
Q4：一组镜头切换，焦距总会差开一些，是不是说明这组镜头安装的不好？还是镜头不行？
A4：这与齐焦距离有关，由于机械加工或安装的误差，不同物镜切换时齐焦性可能存在很小的误差。
Q5：Iris作用是什么呢？
A5：Aperture Iris限制了成像光束的立体角，决定了轴上点成像光束中最边缘光线的倾斜角。Field Iris限制物平面能被系统成像的最大范围的光阑，决定了光学系统的视场。
Q6：双光子显微镜是一种荧光显微镜吗？双光子是指光源吗？
A6：双光子显微镜结合了激光扫描共聚焦显微镜和双光子激发技术，其基本原理是：在高光子密度的情况下显微镜结构图，荧光分子可以同时吸收两个长波长的光子，这两个光子的能量可以加起来，使得荧光分子的电子跃迁至激发态，其效果和使用一个波长为长波长一半的光子去激发荧光分子是相当的，它的光源是高能量超快脉冲激光器。
Q7：聚光镜NA怎么用？
A7：每个聚光镜的NA是固定的，要根据观察的标本的形态和观察方式去选用不同NA的聚光镜。
Q8：有限远和无限远物镜能互换使用吗？如果不考虑放大倍数。
A8：不可以显微镜结构图，物镜适用的光学系统不同。
Q9：不同厂家物镜更换的话，有存在Tube Lens和Objective不共焦的情况吗？
A9：在无限远光学系统中，是不需要共焦的，但要考虑齐焦距离和螺纹参数的Q题。
Q10：Nikon的倒置共聚焦，因为入射到物镜的是近似平行光，物镜有转接环，应该不怎么影响成像吧？
A10：理论上不影响平行光成像，但是要注意像平面要能与pinhole位置匹配。
Q11：对于厚一点的样品，调焦过程中是看到的是每一层的轮廓吗？
A11：通过调焦可以看到处于焦平面位置样品的形态，对于厚一点的样品需要考虑其透光性，切薄片有助于提升图像质量。
Q12：请问现代显微物镜的pupil plane都是在物镜的后焦面上吗？
A12：是的。
Q13：请问老师商业化系统里，如何估算荧光成像过程中，激发光经过物镜在样品面的照射面积？
A13：可以通过荧光照明中的视场光阑调节照明范围，或者简单直接的通过漂白区域判断。
Q14：在物镜和Tube Lens之间可以任意加东西，那么如果要加的东西较大的话 ，原有的物镜与Tube之间的距离不能满足了能不能增加他俩之间的距离呢 能增加多少？增加后对显微镜成像有什么样的影响？
A14：在无限远光学系统中，Tube Lens和物镜不需要共焦，所以可以增加他俩之间的距离。但考虑到实际场景，不能无限制的增加。
Q15：Tube Lens和物镜之间的距离是它们的焦距之和，但是有的倒置显微镜同时有单层和双层架构，那么这个距离是否都能满足呢？
A15：在无限远光路中，Tube lens和物镜之间的距离不需要是它们的焦距之和。
Q16：物镜一定要和tube lens共焦吗？
A16：在无限远光路中，Tube Lens和物镜不需要共焦。
Q17：成像有明显的四角偏差和色差可能的原因是什么？有什么解决方案吗？
A17：原因是观察的像场超出了镜头的视场性能，最直接的解决方法是换更好的镜头。
Q18：不同品牌的 Tube Lens和 Objective 混用除了总倍率变化之外还可能引发什么别的Q题？
A18：理论上讲不会有别的Q题，但对于商品化的产品，要考虑接口是否适配。
Q19：如何提高Z轴分辨率？
A19：可以通过光片显微镜、共聚焦、或者超分辨技术，但是对于一套固定的光学系统，其XYZ的分辨率也是固定的。将标本切薄片使之超过光学系统的分辨率也是一种有效方法。
Q20：结构化照明显微镜就是所说的超分辨吗？
A20：结构化照明显微镜是一种超分辨技术。
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