背景:
近年来,随着医院患者数量的增加,检验科的样本数量也在激增,检测能力的要求越来越高。为了调节质量和效率的矛盾,作为基础检测项目之一的尿常规检测,由于方法学局限性大,很多医院的检验科都采购尿沉渣定量分析仪作为该项目的补充。
Sysmex UF产品作为可以准确定量尿沉渣的产品之一,在尿沉渣检测领域有众多优势,比如核酸荧光方法定量准确,质控系统完善等,成为很多医院采购的重点。
由于传统的尿沉渣检测金标准是显微镜离心镜检ul和ml的换算关系,该方法和仪器法的每ul报告方式有很大差别,为此,很多实验室老师对此提出了疑问:“1. 显微镜下/HP或/LP的报告方式和仪器法尿沉渣的/ul报告方式是什么比例;2. 如何换算而来?”
厂家推荐:
首先,Sysmex UF系列仪器中:HPF和LPF与“/uL”的换算关系如下:
厂家所推荐的转换系数的计算方式,主要根据旧版的JCCLS尿沉渣显微镜检查的金标准,参考如下:
1)10ml原尿,400g离心力,5分钟离心;
2)弃上清,留取200uL重悬;
3)加入50ul染色液染色。
4)最后取15uL使用18*18mm盖玻片压片镜检。
这个过程中存在很多不确定因素,比如样本量是否达10ml、离心力和时间是否达标、离心机种类(水平离心机还是斜面离心机),留取的重悬液是否为200uL以及离心导致细胞挂壁等都成为最后结果的影响因素,从而导致尿液中有形成分的损耗。因此,根据日本总部的评估结果,考虑实际损耗约为50%。
综上所述,再加市场上常见显微镜的视野面积,计算分析过程如下:
X:每ul样本中的沉渣计数(来源于UF-5000)
Y:每高倍视野的沉渣计数(由UF-5000计算所得)
50倍:离心浓缩比例
N:镜检取样量15ul*80%=12ul(JCCLS标准需染色,因此实际检测样本量应“加样量x80%”)
M:离心过程中的损耗比例
0.196mm2:每高倍镜视野下的面积
1LPF=16倍HPF
计算公式:
Y=0.18X
最终得到每高倍视野和“/uL”的比例是0.18,每低倍视野的比例即:0.18*16=2.9
讨论:
由于我国的行标以及操作规程中镜检的流程和日本有所差异,且JCCLS标准已修改,实验室操作各有不同:1)加样量不同,且国内不加染色液;2)离心过程的损耗各有不同;3)是否加盖片。因此推荐各个实验室运用拟合曲线方式,针对厂家推荐的转换系数加以修改验证,或者根据自身实验室的镜检流程,建立适合自身实验室的转换系数。
【参考文件】
1)Aims of the Guidelines on Urinary SedimentExamination Procedures Proposed by the Japanese Committee for ClinicalLaboratory Standards (JCCLS)
2)WS/T229—2002 尿液物理学、化学及沉渣分析
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